Физико-химическая характеристика терпеноидов и методы их анализа

Чувствительность метода ГЖХ определяется типом используемого детектора. При исследовании смеси терпеновых соединений преимущественно используются пламенно-ионизационный детектор и детектор по теплопроводности, чувствительность которых составляет в среднем соответственно 10-10 - 10-13 и 10-8 - 10-10 г/сек [65,75].

) Предварительное фракционирование и вспомогательные реакции

Наиболее простым, но очень эффективным способом предварительного фракционирования смесей терпеноидов является их адсорбционная хроматография на силикогеле. При использовании в качестве растворителя чистого алкана, например пентана, из колонки элюируются только терпеновые углеводороды. Более полярные растворители (эфиры, галогенуглеводороды) элюируют кислородсодержащие терпеноиды. Использование ступенчатого градиентного элюирования при увеличении содержания диэтилового эфира в пентане позволяет разделить отдельные группы кислородсодержащих монотерпеновых соединений. Первыми элюируются эфиры, затем альдегиды и кетоны, последними - спирты, при этом порядок элюирования терпеноидов дает ценную информацию о характере функциональных групп [65].

Количественное определение терпеноидов

Каротиноиды являются одной единственной группой тетратерпенов. Широкое разнообразие физико - химических характеристик (полярность, эктинкция, растворимость и др.) каротиноидов используется при разработке простых и эффективных методов их качественного и количественного анализа.

Для извлечения из сырья липофильных биологически активных веществ (к ним относятся и каротиноиды) в качестве экстрагентов используют: жиры и масла, СО2, органические растворители (хлороформ, гексан, четыреххлористый углерод и т.д.). Также применяются системы несмешивающихся растворителей различной полярности - двухфазные системы экстрагентов (ДС 7). Ранее были показаны преимущества экстракции ДСЭ по сравнению с экстракцией сырья растительным маслом. Было установлено, что количественное содержание липофильных веществ в масляных экстрактах, полученных с применением ДСЭ, значительно выше, чем при экстракции растительного сырья маслом.

В последнее время наибольшее распространение для количественного анализа каротиноидов получили методы ВЭЖХ, зачастую не требующие предварительной подготовки образцов и решающие проблему различной полярности анализируемого класса соединений, применения градиентного элюирования в обращенно - фазовом варианте. Вместе с тем необходимо отметить, что метод градиентного элюирования обладает рядом недостатков, делающих реализацию его затруднительной. Для количественного определения каротиноидов, а также их суммы, применяют спектрофотометрический метод [66,65].